黑龙江畜牧兽医 . 2025 (05)

杨丽华1,2韦珏2覃绍敏2许力士2秦树英2陈凤莲2欧阳康1刘金凤2

1.广西大学动物科学技术学院2.广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部(广西)东盟跨境动物疫病防控重点实验室

摘要：为了筛选出具有抗猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarhea virus, PEDV）的益生菌株，试验通过CCK-8法初步筛选具有抗PEDV的益生菌株，对筛选到的菌株进行鉴定，并对其进行生物学特性研究，再利用CCK-8法评估益生菌不同作用方式（预处理、后处理、同时处理及直接处理）对PEDV感染细胞的抑制效果，筛选出菌株抗PEDV最佳稀释度及作用方式并以最佳稀释度及作用方式处理PEDV,测定半数组织培养感染剂量(TCID50)。结果表明：初步筛选得到4株具有抗PEDV作用的益生菌株，分别为菌株7、A1、MM1和N1-S-4;结合菌种特异性鉴定，4株菌株7、A1、MM1和N1-S-4分别为粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、食窦魏斯氏菌（Weissella cibaria）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。菌株7与菌株A1在pH值为4.0时可以正常生长，耐酸能力强于另外2株；菌株7在3个浓度（0.10%、0.30%和0.50%）胆盐中均可生长，耐胆盐能力强于其他3株；4株菌对Caco-2细胞的黏附能力均较差，其中菌株MM1的黏附率最高，为6.98%;4株菌培养上清液及菌体裂解液的不同稀释度（1/1、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64）以4种不同处理方式作用于感染PEDV的Vero细胞时，均表现出对PEDV的抑制作用，并且直接处理方式的抑制效果较好，其中粪肠球菌裂解液在1/4稀释度下的抑制率最高。TCID50试验进一步证实，1/4稀释度的粪肠球菌裂解液直接作用于感染PEDV的Vero细胞可有效降低病毒滴度。说明粪肠球菌可有效抑制PEDV,具有抗PEDV的作用。

关键词： 益生菌;粪肠球菌;猪流行性腹泻病毒;种属特异性鉴定;体外抗病毒作用;

基金资助： 广西自然科学基金项目(2022GXNSFAA035521)； 广西兽医生物技术重点实验室项目(23-035-32-A-02)；

DOI： 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2024.12.0089

专辑： 农业科技;基础科学

专题： 生物学;畜牧与动物医学

分类号： S852.651

在线公开时间： 2025-05-18 09:15