余丹1,2谢芝勋2赵俊柯1,2张艳芳2谢志勤2谢丽基2尹文巧1,2喻华英1,2

1.广西大学动物科学技术学院2.广西壮族自治区兽医研究所农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室/广西兽医生物技术重点实验室

摘要：圆圈病毒禽源1型(GyVg1)和圆圈病毒人源1型(GyH1)是两种新发现的可引起鸡腺胃炎相关症状的环形病毒，目前在全球多个地区均有检测报道。本研究旨在建立一种能快速同时鉴别GyVg1和GyH1的二重荧光定量PCR方法。使用GenBank中现有的GyVg1和GyH1基因组序列，基于其保守区分别设计相应的特异性引物和探针，经过优化反应条件，建立了GyVg1和GyH1的二重荧光定量PCR检测方法。应用该检测方法对2023年在广西南宁8个地区采集的256份临床样本进行检测，与常规PCR检测和测序结果进行分析比较，进一步验证该方法的有效性。结果显示，所建立的二重荧光定量PCR方法可在1 h内鉴定出GyVg1和GyH1,两套引物探针均可有效扩增，且与其他病原体无交叉反应；检测下限为7.5拷贝/μL,标准曲线相关系数>0.99,批内和批间变异系数<0.45%。临床样品检测结果显示，当模板量≥100.0拷贝/μL时，二重荧光定量PCR测定与常规PCR测定之间的一致性分别为94.3%(GyVg1)和100%(GyH1)。综上，所建立的二重荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好，适用于... 更多

关键词： 圆圈病毒禽源1型;圆圈病毒人源1型;二重荧光定量PCR;

基金资助： 广西科技基地和人才专项基金资助项目(桂科AD17195083)； 广西兽医生物技术重点实验室自主研究基金资助项目(24-035-32-A-01)； 桂农科盟基金资助项目(202409-01)； 广西八桂学者专项基金资助项目(2019A50)；

DOI： 10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.01.09

专辑： 农业科技;基础科学

专题： 生物学;畜牧与动物医学

分类号： S852.65

在线公开时间： 2025-03-03